Determinación de los grupos sanguíneos 2

DETERMINACIÓN CELULAR DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y RH EN TUBO.


OBJETIVO


  • Dterminar el grupo sanguíneo del sistema ABO
  • Determinar el grupo RH (antígeno D)
  • Observar la presencia de aglutinación en tubo y microscopio


Material


  • Gradilla, parafim, tubo de hemolisis y 6 tubos pequeños
  • Pipte pasteur y dispensador de suero fisiológico
  • Micropipeta automática y puntas de plastico desechables
  • centrífuga y visualizador
  • Portaobjetos, cubreobjetos y microscopio.

Reactivos


  • SF
  • Anti-A
  • Anti-B
  • Anti-AB (control)
  • Anti-D
  • Autocontrol Rh


Muestra


  • Sangre anticuagulada

Procedimiento 1:

1. Ponemos en el tubo de hemólisis 0.5 ml de sangre problema.

2.Llenamos hasta arriba de SF y tapamos el tubo con un tapón para agutal y mezclar bien la sangre con SF.

3. Centrifugar durante 5 min a 2500 rpm

4. Extraer el sobrendante con una pipeta pasteur

Repetir los 3 paoss anteriores dos veces más.

Procedimiento 2


  1. Del sedimento de hematíes obtenido del último lavado y centrífugación, coger con una micropipeta ml de hematíes y depositarlos en un tubo pequeño
  2. Añadir 1.9 ml de SF.

Procedimiento 3:

1. Rotular 5 tubos pequeños con A, B, AB, D Y CD

2.Depositamos en cada uno de ellos  o 4 gotas de la dilución de hematíes al 5%

3.Añadimos 3 gotas de suero anti-A, anti-B, anti-AB, anti-D y autocontrol Rh en sus tubos correspondientes.

4. Agitar cada uno de los tubos para que se mezclen bien los reactivos con los hematíes.

5.Esperar 2 min para observar la reacción de aglutinación resultante.



6. Colocar cada tubo sobre el visualizador y observar la presencia o ausencia de aglutinación.

Resultados:
0+, ya que solo se presenta aglutinación en el indicador de Rh.

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