Hemoglobina

Determinación cuantitativa de hemoglobina IVD

26.09.19

Principio del método:

La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en ciametahemoglobina.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hemoglobina presente en la muestra ensayada.

Significado clínico:

La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxígeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cancer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias.
Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancia en lugares de gran altitud.
El diágnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio

Reactivos

• Reactivo de Dabkin- hemoglobin 50x
• Patrón - Hemoglobin cal

Preparación

Reactivo de trabajo (RT):
Para 5 ml 4.9 de agua destilada + 2 gotas de reactivo.

Material adicional.

• Espectofotómetro o analizador para lecturas de 540nm
• Cubetas de 1.0 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestras

• Sangre capilar venosa 

Procedimiento

1. Preparamos las condiciones de ensayo:

• Longitud de onda 540 nm
• Cubeta de 1 cm de paso de luz 
• Temperatura 15-25ºC

2.Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada
3.Pipetear:

4. Mezclar e incubar 3 min a temperatura ambiente

5. Leer la absorbancia del calibrador y la muestra, frente al blanco de reactivo.

A (muestra)=0.466
A (patrón)= 1.030
RESULTADO: 6.78 g/dl