APTT

Determinación cuantitativa del Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (APTT)

PRINCIPIO DEL MÉTODO 

Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de un complejo fosfolipídico y un activador soluble en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro cálcico (CaCl2) hasta la formación del coágulo de fibrina.

SIGNIFICADO CLÍNICO 

La medida del tiempo de APTT, es la determinación más común junto con la PT, sirve para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los defectos de la coagulación intrínseca (Factores VIII, IX, XI, XII). Se usa normalmente para la monitorización de las terapias anticoagulantes con heparina.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS 

• R 1 Activador Ácido elágico Tampón y conservantes. 
• R 2 Iniciador Cloruro cálcico (CaCl2) 
• CONTROL NORMAL 
• CONTROL PATHOLOGIC 

PREPARACION 

Los reactivos están listos para su uso. 
R1: Una vez abierto es estable 1 mes a 2-8ºC. 

CONSERVACION Y ESTABILIDAD 

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. 
Después de un almacenamiento prolongado puede aparecer un sedimento amarillo.

MATERIAL ADICIONAL 

• Coagulómetro o cronómetro y baño a 37ºC ± 0,5ºC. 
• Equipamiento habitual de laboratorio

MUESTRAS 

Plasma obtenido por punción venosa diluido 1/10 en solución de citrato trisódico 3,8%. 

PROCEDIMIENTO 

El reactivo puede emplearse en técnica manual, mecánica, foto-óptica o con cualquier instrumento apto para detectar la formación del coágulo.

TÉCNICA MANUAL 

1. Calentar a 37ºC los reactivos y la muestra. 

2. Mezclar bien los reactivos sin agitarlos. 

3. Pipetear en un tubo de ensayo limpio y seco:
Plasma citratado 100µL 
R1 100µL

 

4. Mezclar bien e incubar exactamente 5 min. a 37ºC (tiempo de activación).

5. Pipetear: 
R 2  100µL 

6. Mezclar 

7. Poner en marcha el cronómetro o el controlador de tiempo del coagulómetro y medir el tiempo de formación del coágulo, a partir de la adición del R2 Iniciador. 

CÁLCULOS 
Los valores se pueden expresar en segundos o en tasa de APTT, dividiendo el resultado de la muestra (sec) por el tiempo de reacción del plasma Control (sec).

25.2/ 16.4 = 1.53