Hierro

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE HIERRO

PRINCIPIO DEL METODO  

El hierro se disocia del complejo sérico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido ascórbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado: 

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra ensayada. 

SIGNIFICADO CLINICO 

El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropénica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas.

 El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. 

REACTIVOS 

PREPARACION  

Reactivo de trabajo (RT):  - Ref: 1001247. 

Disolver  el contenido de un tubo de R 2 Reductor en un frasco de R 1 Tampón. Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. 

Estabilidad: 3 meses a 2-8ºC o 1 mes a temperatura ambiente (15-25ºC). 

CONSERVACION Y ESTABILIDAD

No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Indicadores de deterioro de los reactivos:

- Presencia de partículas y turbidez. 

- Absorbancia (A) del Blanco a 562 nm ≥ 0,020.  

- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 562 nm. 

MATERIAL ADICIONAL  

- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 

- Equipamiento habitual de laboratorio. 

MUESTRAS  

Suero o plasma heparinizado. Libre de hemólisis. Separado lo antes posible de los hematies. 

Estabilidad de la muestra: El hierro es estable de 7 días a 2-8ºC1. 

 PROCEDIMIENTO  

1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . .  562 nm (530-590) Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz 

Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15- 25ºC  

2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada. 

3. Pipetear en una cubeta:  

4. Mezclar e incubar 5 min a 37ºC o 10 min a temperatura ambiente. 

5. Leer las absorbancias (A) del Patrón y la muestra frente al Blanco de reactivo. 

El color es estable como mínimo 30 minutos.   

 

 VALORES DE REFERENCIA 

Hombres 65-175 μg/dL       11,6-31,3 mol/L 

Mujeres 40-150 μg/dL       7,16-26,85 mol/L 

Estos valores son orientativos. 

RESULTADOS.

Absorbancia patrón: 0,091

Absorbancia muestra: 0,141

(0,141/0,091)X100 = 154,94 μg/dL

Desconocemos si la muestra es de un hombre o de una mujer. 

En el caso de que sea de un hombre los valores se encuentran dentro de la normalidad, pero si se trata de una mujer son ligeramente altos